跑胶没那么简单
版主: Softfist
#13 Re: 跑胶没那么简单
尼玛,你就不会试试 2D 胶weiqu 写了: 2024年 2月 7日 17:22 run native gel 才是本事!
鄙人的成名之胶就是, 把200kd 的分子聚体, 差一个电荷, 硬是分开了!
胶长1.5尺! 在4度冷柜中走了一天!
:)
#16 Re: 跑胶没那么简单
胶浓度,离子强度,ph,电场强度不连续。
早期自己配。后来在有钱的实验室都是invitrogen 买现成的胶buffer以及装置。
不知道这点水平能否回去继续干千老还是只能当技术员了
#17 Re: 跑胶没那么简单
“重量” LOL李洪志 写了: 2024年 2月 7日 17:33 胶浓度,离子强度,ph,电场强度不连续。
早期自己配。后来在有钱的实验室都是invitrogen 买现成的胶buffer以及装置。
不知道这点水平能否回去继续干千老还是只能当技术员了
#18 Re: 跑胶没那么简单
具体嘛,
病毒装配的途径是迷, 咱的工作就是找到中间体! 咱偶然发现, 咱native gel上, 有两条带, 一直怀疑是五聚体和六聚体. 但没办法证实.
咱躺在“席”上, 想出了个绝招!我们有个mutant, 与野生的差一个氨基酸, 一个电荷. 咱纯化了野生的和mutant, 然后, 把它们混在一起过夜, 第二天run huge native gel, 果然, 六聚体lane 出现七条带, 五聚体lane 出现六条带!
凭此, 老板开心坏了, 一整套病毒装配的模型有了坚实的实验证据!
病毒装配是有序的过程! 不是一个一个加上去的, 五聚体和六聚体的含量 分布, 是装配的调节点!
当然, 咱还拍到了五聚体和六聚体的电镜照片! 老板后来在圈里被喜称Dr. Donuts!甜圈博士!
(这里的关键是, 本人找到了条件, 在高盐条件下, 只以六聚体存在, 在高疏水条件下, 只以五聚体存在!)
:)
x1

上次由 weiqu 在 2024年 2月 7日 17:54 修改。
#19 Re: 跑胶没那么简单
里面一个关键设计是用强酸根做快离子 弱酸根做慢离子 自动产生压缩效应李洪志 写了: 2024年 2月 7日 17:33 胶浓度,离子强度,ph,电场强度不连续。
早期自己配。后来在有钱的实验室都是invitrogen 买现成的胶buffer以及装置。
不知道这点水平能否回去继续干千老还是只能当技术员了