跑胶没那么简单

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版主: Softfist

monday(星期一)楼主
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#1 跑胶没那么简单

帖子 monday(星期一)楼主 »

99.9%的跑胶师搞不懂SDS PAGE的原理
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李洪志
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#2 Re: 跑胶没那么简单

帖子 李洪志 »

重量,大小,和电荷
lubbock12
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#3 Re: 跑胶没那么简单

帖子 lubbock12 »

我还跑过native page ,不带电荷纯按分子size分离
lubbock12
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#4 Re: 跑胶没那么简单

帖子 lubbock12 »

李洪志 写了: 2024年 2月 7日 17:17 重量,大小,和电荷
果然是李大师 科学门外汉 LOL
ProteinG
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#5 Re: 跑胶没那么简单

帖子 ProteinG »

lubbock12 写了: 2024年 2月 7日 17:20 果然是李大师 科学门外汉 LOL
你的水平也是狗屁,没有电荷你的蛋白怎么跑?

老逼将,轮逼,政庇,拿钱发帖的,不欢迎回我帖子。拿动画冒充真实视频的弱智,要点脸就别回我帖子。

lubbock12
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#6 Re: 跑胶没那么简单

帖子 lubbock12 »

ProteinG 写了: 2024年 2月 7日 17:21 你的水平也是狗屁,没有电荷你的蛋白怎么跑?
你还真是门外汉 LOL
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huangchong(净坛使者)
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#7 Re: 跑胶没那么简单

帖子 huangchong(净坛使者) »

李洪志 写了: 2024年 2月 7日 17:17 重量,大小,和电荷
讲讲不连续胶是怎么回事
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weiqu
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#8 Re: 跑胶没那么简单

帖子 weiqu »

run native gel 才是本事!

鄙人的成名之胶就是, 把200kd 的分子聚体, 差一个电荷, 硬是分开了!

胶长1.5尺! 在4度冷柜中走了一天!

:)
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weiqu
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#9 Re: 跑胶没那么简单

帖子 weiqu »

run native gel 才是本事!

鄙人的成名之胶就是, 把200kd 的分子聚体, 差一个电荷, 硬是分开了!

胶长1.5尺! 在4度冷柜中走了一天!

:)
ProteinG
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#10 Re: 跑胶没那么简单

帖子 ProteinG »

lubbock12 写了: 2024年 2月 7日 17:21 你还真是门外汉 LOL
你还是说说没有电荷的蛋白怎么往电极跑的吧,怂货

老逼将,轮逼,政庇,拿钱发帖的,不欢迎回我帖子。拿动画冒充真实视频的弱智,要点脸就别回我帖子。

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huangchong(净坛使者)
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#11 Re: 跑胶没那么简单

帖子 huangchong(净坛使者) »

lubbock12 写了: 2024年 2月 7日 17:18 我还跑过native page ,不带电荷纯按分子size分离
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#12 Re: 跑胶没那么简单

帖子 yl003760(庸一) »

你们笑死我了
lubbock12
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#13 Re: 跑胶没那么简单

帖子 lubbock12 »

weiqu 写了: 2024年 2月 7日 17:22 run native gel 才是本事!

鄙人的成名之胶就是, 把200kd 的分子聚体, 差一个电荷, 硬是分开了!

胶长1.5尺! 在4度冷柜中走了一天!

:)
尼玛,你就不会试试 2D 胶
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weiqu
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#14 Re: 跑胶没那么简单

帖子 weiqu »

lubbock12 写了: 2024年 2月 7日 17:25 尼玛,你就不会试试 2D 胶
看清楚了?是聚合体, 五聚体和六聚体, 你run 2D 胶, SDS 就破坏了聚合体!

:)
lubbock12
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#15 Re: 跑胶没那么简单

帖子 lubbock12 »

weiqu 写了: 2024年 2月 7日 17:31 看清楚了?是聚合体, 五聚体和六聚体, 你run 2D 胶, SDS 就破坏了聚合体!

:)
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李洪志
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#16 Re: 跑胶没那么简单

帖子 李洪志 »

huangchong 写了: 2024年 2月 7日 17:22 讲讲不连续胶是怎么回事
胶浓度,离子强度,ph,电场强度不连续。
早期自己配。后来在有钱的实验室都是invitrogen 买现成的胶buffer以及装置。
不知道这点水平能否回去继续干千老还是只能当技术员了
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#17 Re: 跑胶没那么简单

帖子 lubbock12 »

李洪志 写了: 2024年 2月 7日 17:33 胶浓度,离子强度,ph,电场强度不连续。
早期自己配。后来在有钱的实验室都是invitrogen 买现成的胶buffer以及装置。
不知道这点水平能否回去继续干千老还是只能当技术员了
“重量” LOL
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weiqu
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#18 Re: 跑胶没那么简单

帖子 weiqu »

lubbock12 写了: 2024年 2月 7日 17:32真千老
具体嘛,

病毒装配的途径是迷, 咱的工作就是找到中间体! 咱偶然发现, 咱native gel上, 有两条带, 一直怀疑是五聚体和六聚体. 但没办法证实.

咱躺在“席”上, 想出了个绝招!我们有个mutant, 与野生的差一个氨基酸, 一个电荷. 咱纯化了野生的和mutant, 然后, 把它们混在一起过夜, 第二天run huge native gel, 果然, 六聚体lane 出现七条带, 五聚体lane 出现六条带!

凭此, 老板开心坏了, 一整套病毒装配的模型有了坚实的实验证据!

病毒装配是有序的过程! 不是一个一个加上去的, 五聚体和六聚体的含量 分布, 是装配的调节点!

当然, 咱还拍到了五聚体和六聚体的电镜照片! 老板后来在圈里被喜称Dr. Donuts!甜圈博士!

(这里的关键是, 本人找到了条件, 在高盐条件下, 只以六聚体存在, 在高疏水条件下, 只以五聚体存在!)



:)
x1 图片
上次由 weiqu 在 2024年 2月 7日 17:54 修改。
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huangchong(净坛使者)
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#19 Re: 跑胶没那么简单

帖子 huangchong(净坛使者) »

李洪志 写了: 2024年 2月 7日 17:33 胶浓度,离子强度,ph,电场强度不连续。
早期自己配。后来在有钱的实验室都是invitrogen 买现成的胶buffer以及装置。
不知道这点水平能否回去继续干千老还是只能当技术员了
里面一个关键设计是用强酸根做快离子 弱酸根做慢离子 自动产生压缩效应
quovadis
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#20 Re: 跑胶没那么简单

帖子 quovadis »

monday 写了: 2024年 2月 7日 17:15 99.9%的跑胶师搞不懂SDS PAGE的原理
你是说泡椒?
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